Часть дипломной работы на тему Обсуждение и результаты по атеросклерозу у кроликов

Содержание:

Список сокращений
Введение
Глава I. Обзор литературы
1.1 Гипотезы и теории патогенеза атеросклероза
1.2 Атеросклеротические изменения аорты и сердца человека
1.3 Экспериментальные модели атеросклероза. Кролик как объект моделирования атеросклероза
Глава II. Организация и методы исследования
2.1 Иммунизация
2.2 Микроскопическое исследование стенки дуги аорты кролика
Глава Ш .Результаты. Обсуждение результатов
Вывод
Список литературы

Введение:

Атеросклероз (от греч.ἀθέρος — мякина, кашица + σκληρός — твёрдый, плотный) — хроническое заболевание артерий эластического и мышечно-эластического типа, сопровождающееся отложением холестерина и некоторых фракций липопротеинов в интиме сосудов. Отложения формируются в виде атероматозных бляшек. Последующее разрастание в них соединительной ткани (склероз), и кальциноз стенки сосуда приводят к деформации и сужению просвета вплоть до облитерации (закупорки). Атеросклероз сосудов сердца ведет к развитию ишемической болезни сердца и других сердечно-сосудистых заболеваний. Теорий, объясняющих причины возникновения атеросклероза — множество, но ни одна из них до сих пор не может претендовать на универсальность. Поэтому и эффективной профилактики и лечения атеросклероза пока не существует .
Кроме того, на сегодняшний день отсутствуют адекватные экспериментальные модели атеросклероза, в полной мере воспроизводящие
стадии и признаки атеросклероза человека. Традиционно используемые подходы для моделирования атеросклероза основаны на развитии у животных состояния гиперхолестеринемии, но результаты исследований последних лет не подтверждают роль избыточного потребления холестерина как этиологического фактора атерогенеза.
По современным представлениям о патогенезе атеросклероза считается, что в его основе лежат воспалительные реакции . Некоторые исследователи предлагают рассматривать атеросклероз как аутоиммунное
заболевание. В качестве мишени аутоиммунной реакции при развитии атеросклероза рассматривают белки теплового шока, окисленные липопротеины низкой плотности, а также нативные липопротеины плазмы.
В частности, об этом свидетельствует факт, что уровень аутоантител против нативных липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) при атеросклерозе выше, чем у здоровых людей . Кроме того, недавно полученные результаты исследований, указывают на то, что аутоиммунные Т-клетки, распознающие эпитопы апопротеинаB100 нативных ЛПНП, способствуют развитию атеросклероза, тогда как ингибирование Т-клеточного ответа против нативных ЛПНП подавляет развитие атеросклероза .
На основании этих фактов на кафедре иммунологии и клеточной биологии УдГУ была предложена гипотеза о том, что причиной атерогенеза может выступать иммунная реакции к нативным липопротеинам плазмы. Для проверки гипотезы была разработана экспериментальная модель атеросклероза крыс, вызванного иммунизацией нативными липопротеинами человека. Было показано, что однократная иммунизация крыс нативными ЛПНП или нативными липопротеинами высокой плотности (ЛПВП) человека, вызывает у крыс продукцию антител к нативным липопротеинам, появление эпикардиально жира, увеличение объема висцерального жира в брюшной полости, а также развитие атеросклеротических изменений в стенке аорты – разрушение интимы, дезорганизацию медии, скопление лейкоцитов в адвентиции .
В данной экспериментальной модели, обнаруженные атеросклеротические изменения сосудов можно классифицировать как ранние, более сложные поражения – атеросклеротическую бляшку выявить не удалось. Возможная причина состоит в том, что в отличие от человека у мелких млекопитающих есть некоторые особенности в строении интимы. Так, у крыс и мышей интима состоит из эндотелия, расположенного непосредственно на внутренней эластической мембране, это говорит о том, что у крыс и мышей практически отсутствует или слабо различимо субэндотелиальное пространство, в котором начинает развиваться атеросклеротическая бляшка у человека.
В связи с этим было принято решение использовать для индукции сложных атеросклеротических поражений сосудов при моделировании атеросклероза путем иммунизации гетерологичными нативными липопротеинами животное, строение сосудов которого сходно со строением сосудов человека. Таким животным может выступать кролик. Кролик филогенетически ближе к приматам, чем грызуны, имеет схожий с человеком липидный обмен. Морфологическое исследование интимы аорты взрослых молодых кроликов показало наличие субэндотелиального слоя заметной ширины. Даже в эмбриональный период интима кроликов более развита, чем у мышей, крыс и морских свинок и содержит эластиновые, коллагеновые волокна и фибробласты . Известно, что у кроликов наиболее толстая интима наблюдается в дуге аорты и постепенно утончается к брюшной части аорты.
В связи с этим целью работы является проверка гипотезу о том, что иммунизация кроликов нативными липопротеинами высокой плотности приведет к развитию в стенки дуги аорты осложненных атеросклеротических поражений.
Задачи исследования:
1. Провести гистологический анализ стенки дуги аорты кроликов, иммунизированных нативными липопротеинами высокой плотности.
2. Провести сравнительный анализ изменений дуги аорты кроликов и изменений, выявляемых при атеросклерозе человека.

Заключение:

1. Однократная иммунизация кроликов нативными липопротеинами высокой плотности человека в дозе 200 мкг вызывает у кроликов развитие атеросклеротических изменений в стенке дуги аорты — увеличению толщины комплекса интима-медиа, отложению соединений кальция, изменению фенотипа ГМК, формированию атеросклеротических бляшек, характеризующихся обширным липидным ядром, инфильтрацией лейкоцитами, накоплением эритроцитов.
2. Гистологические изменения, выявленные в стенке дуги аорты у кроликов, иммунизированных нативными липопротеинами высокой плотности подобны изменениям, обнаруживаемым при атеросклерозе человека.

Фрагмент текста работы:

Глава 1. Обзор литературы
1.1 Гипотезы и теории патогенеза атеросклероза
Атеросклероз лежит в основе широкого спектра кардиоваскулярных заболеваний. За длительную историю изучения атеросклероза сложились устойчивые представления о его патогенезе, которые лежат в основе профилактики, диагностики и терапии заболевания. Но, несмотря на многочисленные исследования, этиология и патогенез атеросклероза остаются до конца неизвестными. До сих пор не существует универсальной теории, объясняющей причины этого заболевания. Более того, существует более десятка различных гипотез, которые каждая со своей позиции, пытаются объяснить механизмы развития атеросклероза. Представления о ведущих факторах риска атеросклероза сформулированы в тромбогенной, иммунной, клональной, вирусной теориях, теории реакции на повреждение, липопротеидной и нервно-метаболической гипотезах .
Ни одна из предложенных теорий патогенез атеросклероза не смогла полностью раскрыть механизм, лежащий в основе заболевания и выявить инициирующий фактор атерогенеза. При этом сегодня хорошо описаны стадии формирования атеросклеротических изменений, предложены их классификации. Недостатком большинства теорий является то, что они часто рассматривают не патогенез заболевания в целом, а механизмы развития бляшки (атерогенез) вне связи с общими метаболическими нарушениями. Между тем именно первичные биохимические нарушения в большинстве случаев являются главной движущей силой заболевания1.
Центральной парадигмой патогенеза атеросклероза долгие годы являлась холестериновая концепция. Начиная со второй половины XX века, велись активные клинические и эпидемиологические исследования по изучению связи повышенного уровня холестерина с развитием атеросклероза. Их результатом стало формирование устойчивых представлений, что основным этиологическим фактором атеросклероза является высокий уровень холестерина в крови, который возникает в результате избыточного потребления холестерина. Открытие липопротеинов, изучение их метаболизма способствовало появлению представлений о том, что нарушение метаболизма классов липопротеинов приводит к атерогенезу. Особый интерес вызвали липопротеины низкой плотности (ЛПНП), как основные переносчики холестерина у человека. Но многочисленные исследования не обнаружили связи между степенью развития атеросклероза и уровнем холестерина в крови. Атеросклеротические повреждения наблюдались у людей с низким и высоким уровнем холестерина в крови .